TP Thermofluor

Thermodynamic Stability of Carbonic Anhydrase: Measurements of Binding Affinity and. Stoichiometry Using ThermoFluor Biochemistry 2005, 44, 5258-5266.
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TP Thermofluor

Thermofluor (http://www-bio3d-igbmc.u-strasbg.fr/~cura/MEC/) All equilibrium constants are assumed to be temperature dependent. ThermoFluor includes an environmentally sensitive fluorescent dye that interacts preferentially with non-native protein, generated under denaturing conditions . Todd et al. Drug Discovery Today: Technologies (2005) 3 267-273

Tm rouge= 40°C, Tm vert= 53°C, Tm bleu= 46°C rouge = protéine seule, vert = protéine + m7GTP, bleu protéine + ARN

Article Todd et al. Drug Discovery Today: Technologies (2005) 3 267-273 Affinity assays for decrypting protein targets of unknown function Quel avantage présente la technique de thermofluor (ou differential scanning fluorimetry) par rapport à la calorimétrie en terme de quantité de protéine requise?

Quelle application du thermofluor est elle décrite dans cet article ?

En quoi consiste l’expérience décrite dans l'article ?

Pourquoi la fixation d’un ligand augmente – t-elle le Tm ? Vers quelle forme de la protéine, native ou dénaturée (par la chaleur), la fixation du ligand déplacet' elle l'équilibre?

Les variations de Tm renseignent-elles sur l’affinité du ligand ? Que faut-il faire varier?

Quelle représentation (courbe) permet de juger de l'efficacité d'un ligand ou d'un tampon?

Qu'a permis de trouver cette technique dans l'exemple de la protéine CFE88 cité dans l'article?

Daumantas Matulis, James K. Kranz, F. Raymond Salemme, and Matthew J. Todd (2004) Thermodynamic Stability of Carbonic Anhydrase: Measurements of Binding Affinity and Stoichiometry Using ThermoFluor Biochemistry 2005, 44, 5258-5266 Pour quel type d' expériences les auteurs utilisent-ils le thermofluor? En quoi consiste l’expérience ? Pourquoi la fixation d’un ligand augmente –t-elle le Tm ? Les variations de Tm renseignent-elles sur l’affinité du ligand ?